标题:高温致畸金黄地鼠神经管cDNA文库的构建与鉴定
作者:张静;高项茂;李少玲;王立言
作者机构:[张静] 山东大学医学院组织学与胚胎学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[高项茂] 山东大学医学院组织学与胚胎学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[李少玲] 山东 更多
来源:解剖学杂志
出版年:2005
卷:28
期:5
页码:493-496
关键词:神经管畸形; 高温; cDNA文库; 金黄地鼠
摘要:目的:构建高温致畸金黄地鼠神经管cDNA文库.方法:在高温致神经管畸形动物模型上,提取高温致畸金黄地鼠胚胎神经管总RNA,用SMARTTM cDNA文库构建试剂盒反转录合成cDNA第1链,经LD-PCR合成全长双链cDNA,去除小于500bp的片断后与lambdaTriplEx2噬菌 体左、右臂连接,体外包装,构建成未扩增cDNA文库,再进行文库扩增.测定未扩增和扩增文库的滴度及重组率;随机挑取噬菌斑,经PCR扩增,电泳检测所 构建cDNA文库的质量.结果:未扩增文库滴度为2.03*106pfu/ml,重组率为98.4%,文库扩增后滴度达2.503*109 pfu/ml,重组率为97.6%.插入片段长度分布于500~3000bp之间.结论:成功地构建了高质量的高温致畸金黄地鼠神经管cDNA文库.
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=JPXZ200505003&DbName=CJFQ2005
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