标题:人BNIP3真核表达载体和shRNA表达载体的构建及其对肝癌细胞自噬的影响
作者:孙磊;魏清;张颖;韩丽辉;
作者机构:[孙磊;魏清;张颖;韩丽辉]山东大学医学院免疫学研究所
来源:山东大学学报(医学版)
出版年:2012
期:06
页码:70-74+79
关键词:BNIP3;表达载体;shRNA;自噬;癌;肝细胞
摘要:目的利用人BNIP3的真核表达载体和靶向BNIP3的shRNA表达载体,研究BNIP3过表达和封闭时对肝癌细胞自噬的影响。方法从人肝癌细胞系中,通过RT-PCR扩增人BNIP3基因编码区序列,酶切后插入pcDNA3.1-His-C载体,以此构建重组pcDNA3.1-BNIP3真核表达载体。同时构建靶向人BNIP3基因的shRNA表达载体pSilencer-BNIP3。分别经测序、酶切、RT-PCR和Western blot等方法对重组载体是否构建成功进行验证。并通过采用Western blot检测自噬标志物LC3蛋白的剪切,研究BNIP3过表达和抑制时对肝癌细胞自噬的影响。结果pcDNA3.1...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB201206014&DbName=CJFQ2012
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