标题:胸腺素α1-胸腺五肽在大肠杆菌中的表达及表达条件优化
作者:谢琦;李娟;王凤山;
作者机构:[谢琦;李娟;王凤山]桂林医学院生物技术学院;[谢琦;李娟;王凤山]山东大学药学院生化与生物技术药物研究所
来源:中国生化药物杂志
出版年:2011
期:04
页码:265-268
关键词:胸腺素α1-胸腺五肽;胸腺融合肽;GST融合蛋白;大肠杆菌;表达条件
摘要:目的探讨胸腺素α1-胸腺五肽(Tα1-TP5)在大肠杆菌中的表达及表达条件优化。方法将化学合成的Tα1-TP5基因与原核表达载体pGEX-4T-1融合并转化至E.coliBL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统研究培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度及诱导时间等条件对融合蛋白表达量的影响。融合蛋白经GST琼脂糖珠亲和色谱纯化及重组肠激酶切割后,电喷雾质谱鉴定Tα1-TP5。结果选用TB培养基,在菌体对数生长中后期加入终浓度为0.05 mmol/L的IPTG,37℃诱导5 h,GST融合蛋白的表达...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SHYW201104005&DbName=CJFQ2011
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