标题:新型基因佐剂SPreS2真核表达载体的构建及其瞬时表达
作者:赵群力;闵娟;周怀瑜;古钦民;丛华;李瑛
作者机构:[赵群力] 山东大学医学院寄生虫学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[闵娟] 山东大学医学院寄生虫学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[周怀瑜] 山东大学医学院寄 更多
来源:山东大学学报. 医学版
出版年:2010
卷:48
期:9
页码:29-33+39
关键词:基因佐剂; 基因; 真核表达载体; 瞬时表达
摘要:目的 构建重组真核表达载体pVAXl-SPreS2作为基因佐剂,用以增强或调节弓形虫DNA疫苗的体液及细胞免疫效果.方法采用重叠延伸PCR技术,扩增乙 肝病毒表面抗原S和PreS2基因,引入编码GSGSGS柔性多肽序列作为接头拼接S和PreS2基因,构建重组克隆载体pMD18T-SPreS2和重 组真核表达载体pVAXl-SPreS2,分别进行PCR、酶切和测序鉴定;脂质体法将重组载体pVAXl-SPreS2转染人成纤维细胞,建立体外真核 细胞瞬时表达系统,SDS-PAGE和Western blot检测重组载体转染HFF细胞瞬时表达状况及其表达产物的免疫活性.结果 PCR、酶切、测序结果表明,重组克隆载体pMD18T-SPreS2和重组真核表达载体pVAX1-SPreS2正确构建,融合基因SPreS2在真核 细胞中可以瞬时表达,其表达产物具有一定的免疫活性.结论成功构建重组真核表达载体 pVAXl-SPreS2,为增强或调节弓形虫DNA疫苗免疫效果提供一种新型基因佐剂
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB201009009&DbName=CJFQ2010
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