标题:应用表达载体介导siRNA抑制乳腺癌细胞MCF-7血管内皮生长因子-C基因的表达
作者:孙平[1];刘艳丽[2];赵毅玲[3];李丽[4];刘执玉[2]
作者机构:[孙平]牡丹江医学院解剖教研室,黑龙江牡丹江157011,中国.;[刘艳丽;刘执玉]山东大学医学院解剖学教研室,济南250012,中国.;[赵毅玲]牡丹江医学院红旗医院超声室,黑 更多
通讯作者:Liu, ZY(lymph@sdu.edu.cn)
通讯作者地址:[Liu, Z.-Y] Department of Anatomy, School of Medcine, Shandong University, Ji'nan 250012, China;
来源:解剖学报
出版年:2008
卷:39
期:6
页码:867-871
DOI:10.3321/j.issn:0529-1356.2008.06.018
关键词:小干扰RNA;血管内皮生长因子-C;MCF-7;反转录聚合酶链式反应;
摘要:目的探讨表达载体介导小干扰RNA(siRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达的抑制作用。方法设计合成一对编码后可形成小发夹结构针对VEGF-C基因的siRNA的DNA序列,将其连人pRNAT-U6.1/Neo质粒中,构建VEGF-CsiRNA表达载体。表达载体进行PCR及测序鉴定,并分别转染MCF-7细胞,半定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测转染前后MCF-7细胞VEGF—C基因表达的变化。结果PCR和DNA测序证实,携带VEGF—CsiRNA表达载体构建成功,VEGF-C基因的mRNA和蛋白表达量与空质粒转染相比均明显下降(P〈O.05),在mRNA水平其表达抑制率为61.8%;在蛋白表达水平其表达抑制率为78.3%。结论本研究构建的VEGF-CsiRNA表达载体可有效抑制MCF-7细胞VEGF-C的mRNA和蛋白表达,为进一步以VEGF-C为靶点的乳腺癌治疗实验研究奠定了基础。
收录类别:SCOPUS
资源类型:期刊论文
原文链接:https://www.scopus.com/inward/record.uri?eid=2-s2.0-60349126606&partnerID=40&md5=ec8fb921d4f9f88dbbbc7fea03007b7c
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