标题:特异siRNA抑制宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒16型E6表达的研究
作者:栾怡;于修平;赵蔚明;周亚滨;白晓卉
作者机构:[栾怡] 山东大学医学院微生物学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[于修平] 山东大学医学院微生物学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[赵蔚明] 山东大学医学院微 更多
来源:中华微生物学和免疫学杂志
出版年:2006
卷:26
期:7
页码:598-602
关键词:人乳头状瘤病毒; 子宫颈肿瘤; 细胞生长
摘要:目的 优化HPV-16 E6癌基因特异的U6质粒表达的siRNA,抑制HPV癌基因表达及其对子宫颈癌细胞生长繁殖的影响。方法 选择4个分别针对HPV-16 E6 mRNA外显子和内含子序列为靶序列,合成DNA链,构建表达HPV-16 E6短发卡样dsRNA的重组pSilencer1.0-U6载体,导入HPV-16DNA阳性的宫颈癌细胞株CaSki中,观察该细胞中HPV-16 E6、E7基因表达水平及其蛋白含量的变化,并观察细胞生长被抑制的情况。结果 4种HPV-16 E6 siRNA均能降低宫颈癌细胞CaSki的生长速率。通过细胞生长曲线观察到HPV-16 E6 shRNA表达质粒导入细胞0-96h内,可降低细胞生长速度。荧光定量RT-PCR检测HPV-16 E6 siRNA可使宫颈癌细胞株CaSki中HPV-16 E6、E7基因转录的mRNA水平降低,其中针对E6 mRNA内含子的重组shRNA只抑制E6基因的表达水平。Western blot分析表明,4个HPV-16 E6 siRNA作用72h后,未能检测到宫颈癌细胞中HPV-16 E6蛋白。结论 HPV-16 E6 siRNA能使宫颈癌细胞CaSki生长缓慢;选择针对E6内含子的siRNA作用位点,特异性抑制E6表达;而针对E6外显子的siRNA作用位点,可 抑制E6和E7基因的表达,是用于治疗HPV阳性宫颈癌细胞的理想靶位。
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=ZHWS200607008&DbName=CJFQ2006
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