标题:副黏病毒F蛋白融合活性位点中病毒特异性氨基酸基因突变分析
作者:柴相君;任桂芳;潘新良;任桂杰;王志玉
作者机构:[柴相君] 山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科, 济南, 山东 250012, 中国.;[潘新良] 山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科, 济南, 山东 250012, 中国.;[任桂芳] 济南市第四人民医院 更多
通讯作者:Wang, ZY(zhiyu.wang@sdu.edu.cn)
通讯作者地址:[Wang, Z.-Y] Department of Virology, College of Public Health, Shandong University, Ji-nan 250012, China;
来源:中华微生物学和免疫学杂志
出版年:2009
卷:29
期:6
页码:485-490
DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2009.06.001
关键词:副黏病毒; 融合蛋白; 活性位点; 病毒特异性氨基酸; 基因突变
摘要:目的 了解副黏病毒融合蛋白(F)融合活性位点中的病毒特异性氨基酸在细胞融合中的作用.方法 以新城疫病毒(NDV)和人副流感病毒(hPIV)为例,在已确定的F蛋白融合活性位点中对病毒特异性氨基酸进行定点突变,然后将突变体F基因与同源或异 源的血凝素.神经氨酸酶(HN)基因共转染BHK21细胞后,在真核细胞中表达.Giemsa染色和指示基因法检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS )检测F蛋白的表达效率.结果 在NDV F的突变体中,N150D-L152D的融合功能达到野毒株的46.31%;而N257D-N258D-Q259E、G271D-N272D和Q279E -Q281E的融合活性却几乎消失,分别只有野毒株的1.25%、3.14%和2.23%;N296D-N297D的融合功能是野毒株的97.68%.在 hPIV F的突变体中,D143A-E145A的融合功能达到野毒株的32.63%;E223Q-K224A几乎不能形成合胞体,其融合活性只有野毒株的1.91 %;K263A-R265A、D268A-D270A和R475A-R476A的融合功能分别是野毒株的14.63%、19.52%和28.95%.FA CS结果表明,NDV F的N257D-N258D-Q259E、G271D-N272D和Q279E-Q281E突变体及hPIVF的E223Q-K224A突变体F蛋白在细 胞表面几乎没有表达;其余所有突变体F蛋白的表达效率与野毒株相比,基本不变.结论 对于NDV F来说,N257、N258、Q259、G271、N272、Q279、Q281对NDV F的特异性细胞融合功能起重要作用;N150和L152也起一定的作用,但是N296和N297却没有作用.对于hPIV F来说,E223和K224对hPIV F的特异性细胞融合功能起非常重要的作用;D143、E145、K263、R265、D268、D270、R475、R476的作用也很重要.
收录类别:CSCD;SCOPUS
资源类型:期刊论文
原文链接:https://www.scopus.com/inward/record.uri?eid=2-s2.0-84863251190&doi=10.3760%2fcma.j.issn.0254-5101.2009.06.001&partnerID=40&md5=e76b9c2240e6d36a2adf32fe19eafdd9
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