标题:腺病毒介导MOMP基因转染对树突状细胞免疫功能的影响
作者:吕慧;王红;李湘新;齐眉;刘娟;郑燕;李靖;赵蕾;杨熙;于修平;赵蔚明
作者机构:[吕慧] 山东省疾病预防控制中心, 济南, 山东 250014, 中国.;[王红] 山东大学医学院微生物学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[齐眉] 山东大学医学院微生物学教研 更多
通讯作者:Department of Medical Microbiology, School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, China;(zhaowm@sdu.edu.cn)
来源:中华微生物学和免疫学杂志
出版年:2008
卷:28
期:1
页码:55-60
关键词:沙眼衣原体; 主要外膜蛋白基因; 腺病毒载体; 树突状细胞
摘要:目的 探讨腺病毒(Ad)介导E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)基因转染对树突状细胞(DC)的表型及体内免疫功能的影响.方法 用小鼠重组粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白细胞介素4(IL-4)从小鼠骨髓干细胞中诱导培养DC,并用大肠杆菌脂多糖(LPS)促进 DC的成熟,流式细胞仪检测DC表型.用不同感染滴度(MOI)的含增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组Ad转染DC,荧光显微镜下观察EGFP的表 达细胞百分率,选择最佳MOI;用最佳MOI的含MOMP基因的重组腺病毒(Ad-MOMP)转染DC,流式细胞术检测转染前后DC表型变化,并用活细胞 计数试剂盒8(CCK-8)检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖的能力;ELISA检测转染前后DC分泌细胞因子及DC、T细胞共同培养上清中细胞因子 的水平.Ad-MOMP转染DC经尾静脉免疫小鼠,ELISA检测其脾脏淋巴细胞分泌的细胞因子.结果 诱导的DC形态典型,表面高表达CD11c、MHCⅡ类分子,中度表达CD80分子.MOI=1000为重组Ad转染DC最佳滴度,此时90%以上的DC 表达荧光,Ad-MOMP转染DC后能检测到MOMP的表达.Ad-MOMP转染对DC表面的特征性表型CD11c无影响,而CD80及MHCⅡ表达上调 ;转染后的DC分泌大量IL-12,具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,并刺激T细胞分泌大量IFN-gamma.Ad-MOMP转染DC后尾静 脉免疫小鼠,其脾细胞产生高水平的IFN-gamma.结论 Ad载体能介导外源MOMP基因在DC中的表达,Ad-MOMP转染DC后MOMP基因的表达能增强DC抗原提呈功能,促进DC活化,转染后的DC与T细 胞共孵育能诱导T细胞向TH1细胞分化,体内实验表明Ad-MOMP转染DC能诱导衣原体特异性TH1反应.这为Ad-MOMP转染的DC疫苗用于免疫治 疗提供了理论依据和技术基础.
收录类别:CSCD;SCOPUS
Scopus被引频次:1
资源类型:期刊论文
原文链接:https://www.scopus.com/inward/record.uri?eid=2-s2.0-45149109403&partnerID=40&md5=56e54344b7ff8c815c328cb5a313c4af
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