标题:外源性tRNAser对人乳头瘤病毒E7基因表达的影响
作者:赵蔚明;卜淑蕊;王红;刘文军;于修平
作者机构:[赵蔚明] 山东大学医学院微生物学教研室, 济南, 山东 250000, 中国.;[王红] 山东大学医学院微生物学教研室, 济南, 山东 250000, 中国.;[于修平] 山东大学医学院微 更多
来源:山东大学学报. 医学版
出版年:2004
卷:42
期:1
页码:5-8
关键词:乳头状瘤病毒; 人; 基因表达; 转移; 丝氨酸
摘要:目的:探讨哺乳动物细胞中特定外源性tRNAser(CGA)的表达对HPV6b E7蛋白转译的影响,为研究HPV抗原表达的机制提供实验依据.方法:提取重组真核表达质粒pSV tRNAser(含人tRNAser cDNA的全部序列)、pcDNA3-WtE7(含野生型HPV 6b E7 ORF)、pcDNA3-HuE7(含优化密码人源化HPV 6b E7 ORF),EcoR I酶切鉴定pSV tRNAser,KpnI和EcoRI双酶切鉴定pcDNA3-HuE7和pcDNA3-WtE7.将质粒DNA pSV tRNAser分别与pcDNA3-WtE7或pcDNA3-HuE7混合,脂质体介导共转染COS-1细胞.转染后48 h,做免疫荧光染色.结果:重组质粒酶切鉴定结果正确.免疫荧光检测显示:与野生型E7基因单独转染组相比,pSV tRNAser与pcDNA3-WtE7共转染的COS-1细胞中,E7蛋白的表达增强.pcDNA3-HuE7质粒单独转染的COS-1细胞中优化密码 E7基因可获得有效表达,共转染后,荧光阳性细胞未见明显增多.Southern blot检测结果显示,在400 bp处可见特异DNA条带,说明质粒pSV2tRNAser已转入COS-1细胞.结论:补充外源性pSV tRNAser对COS-1细胞中野生型HPV6b E7基因的表达有一定程度的增强作用.
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB200401001&DbName=CJFQ2004
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