标题:乙肝病毒核心蛋白真核表达载体的构建与表达
作者:赵培庆;曲忠花;盖潇潇;张晓宁;高立芬;梁晓红
作者机构:[赵培庆] 山东大学医学院免疫学研究所, 济南, 山东 250012, 中国.;[曲忠花] 山东大学医学院免疫学研究所, 济南, 山东 250012, 中国.;[盖潇潇] 山东大学医学院免疫 更多
来源:山东大学学报. 医学版
出版年:2010
卷:48
期:2
页码:67-71
关键词:肝炎,乙型; 病毒核心蛋白质类; 遗传载体; 基因表达
摘要:目的 构建2种包含乙肝病毒核心蛋白(HBc)基因的真核表达载体,检测其在人肝癌细胞系BEL7402中的表达.方法 以质粒pUC19/3.0HBV作为模板,PCR扩增HBc基因,分别以pcDNA3.0和pEGFP-N1为母本,构建含HBc基因的真核表达载体pc DNA-HBc-HA及pEGFP-HBc.通过单、双酶切、PCR及DNA测序鉴定其正确性.利用脂质体将其分别转染入人肝癌细胞系BEL7402,并 采用RT-PCR、Western blot及荧光显微镜观察的方法,分别检测其mRNA、蛋白质水平的表达.结果 获得与预期分子量大小一致的DNA片段,转染2种质粒的BEL7402细胞均可高水平表达HBc mRNA,而空载体转染组则无表达,转染pEGFP-HBc转染组及pEGFP-N1转染组,均有较强的绿色荧光表达,pcDNA-HBc-HA转染组细 胞可检测到HBc-HA融合蛋白的表达.结论 成功构建2种携栽HBc基因的真核表达载体,并可在人肝癌细胞系BEL7402中有效表达.
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB201002015&DbName=CJFQ2010
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