标题:血小板生成素在毕赤酵母中的表达
作者:邢振兰,张红卫,郭树华,林泉,吴祖泽
作者机构:[邢振兰,张红卫,郭树华,林泉,吴祖泽]山东大学生命科学院发育生物学研究所!山东济南250100,山东大学生命科学院发育生物学研究所!山东济南250100,中国军事医学科学 更多
来源:山东大学学报(自然科学版)
出版年:2001
期:01
页码:90-94
关键词:血小板生成素;毕赤酵母;基因重组;诱导表达
摘要:以人胎肝cDNA文库为模板 ,用PCR和DNA重组技术 ,将TPOcDNA克隆到pGEM○R T载体并测序 ,再将目的片段亚克隆到分泌型表达载体上获得重组质粒pPIC9K/TPO ,并通过PCR引物设计、扩增和DNA连接使毕赤酵母α 因子的信号肽序列取代TPO固有的信号肽序列 ,使之与毕赤酵母的α 交配因子(MFα)融合 ,该表达载体受AOX1强启动子的调控 .经电转化和G4 1 8筛选获重组酵母KM71 /pPIC9K/TPO ,并用甲醇进行诱导表达 .经甲醇诱导后 ,酵母重组子可高效分泌表达TPO .经SDS PAGE和WesternBlot分析 ,显示重组人TPO(rhTPO)分子量约为...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDDX200101015&DbName=CJFQ2001
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