标题:荧光定量RT-PCR法检测OATP-B和OATP-D mRNA表达
作者:丁晓燕;王立新;孔庆暖;张日民;王莉莉;郭成浩
作者机构:[丁晓燕] 山东大学医学院病理学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[郭成浩] 山东大学医学院病理学教研室, 济南, 山东 250012, 中国.;[王立新] 江苏省淮安市第一人 更多
来源:山东大学学报. 医学版
出版年:2009
卷:47
期:7
页码:70-73+77
关键词:逆转录聚合酶链反应; 荧光定量; OATP基因; TA克隆
摘要:目的 建立荧光定量RT-PCR检测肺癌及正常肺组织中人类有机阴离子转运多肽(organic anion transporting polypeptide,OATP)OATP-B、OATP-D mRNA表达的方法,了解肺癌和正常肺组织中OATP-B、OATP-D mRNA的表达水平.方法 利用RT-PCR方法从肺癌及正常肺组织中扩增出目的 基因片段,用TA克隆的方法将基因片段插入到PGEM-T质粒载体中,在Line-Gene荧光定量检测系统上建立检测OATP-B、OATP-D mRNA表达的标准曲线,并通过40例肺癌及正常肺组织标本进行验证.结果 成功构建了OATP基因的质粒重组子,建立了在mRNA水平定量检测OATP-B、OATP-D基因的标准曲线,相关系数为0.998.以荧光定量RT- PCR法检测,OATP-B、OATP-D的mRNA在肺癌及正常肺组织中均有表达,且肺癌中OATP-B、OATP-D mRNA的表达水平高于正常肺组织(P<0.05).结论 成功建立了荧光定量RT-PCR检测OATP-B、OATP-D mRNA表达的方法,检测结果用绝对拷贝数表示,定量准确可靠,敏感性高.
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB200907019&DbName=CJFQ2009
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