标题:蠕形螨ISSR-PCR的反应体系优化及引物筛选
作者:刘艳荣;刘付红;肖克源;郭淑玲;冯玉新;袁方曙;
作者机构:[刘艳荣;刘付红;肖克源;郭淑玲;冯玉新;袁方曙]山东大学医学院病原生物学研究所;[刘艳荣;刘付红;肖克源;郭淑玲;冯玉新;袁方曙]山东大学医学院细胞生物学研究所 更多
来源:山东大学学报(医学版)
出版年:2012
期:01
页码:57-61
关键词:螨;微卫星重复;反应体系优化;DNA引物
摘要:目的以蠕形螨的DNA为模板,对蠕形螨简单重复序列锚定PCR(ISSR-PCR)反应体系优化并对ISSR引物进行筛选,为ISSR分析奠定基础。方法用自然沉降法收集山羊蠕形螨,用基因组DNA提取试剂盒提取山羊蠕形螨DNA,并以此为模板,以(CA)8RG(R为1分子的嘧啶)为引物,利用正交实验法,从Mg2+浓度、引物用量、dNTPs、DNA模板用量和TaqDNA聚合酶以及退火温度对蠕形螨ISSR-PCR反应体系进行优化,并以优化的反应体系筛选ISSR-PCR的引物。结果 ISSR-PCR 25μL最佳反应体系包括:0.4 mmol/L Mg2+、30 pmol引物、30~60 ng模板DNA、2u ...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB201201014&DbName=CJFQ2012
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