标题:胸腺素alpha1-胸腺五肽在大肠杆菌中的表达及表达条件优化
作者:谢琦;李娟;王凤山
作者机构:[谢琦] 桂林医学院生物技术学院, 桂林, 广西 541004, 中国.;[李娟] 山东大学药学院生化与生物技术药物研究所, 济南, 山东 250012, 中国.;[王凤山] 山东大学药学院 更多
来源:中国生化药物杂志
出版年:2011
卷:32
期:4
页码:265-268
关键词:胸腺素alpha1-胸腺五肽; 胸腺融合肽; GST融合蛋白; 大肠杆菌; 表达条件
摘要:目的探讨胸腺素alpha1-胸腺五肽(Talpha1-TP5)在大肠杆菌中的表达及表达条件优化。方法将化学合成的Talpha1-TP5基因与原核 表达载体pGEX-4T-1融合并转化至E.coliBL21(DE3),异丙基-beta-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。利用SDS-PAG E电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统研究培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度及诱导时间等条件对融合蛋白表达量的影响。融合蛋白经G ST琼脂糖珠亲和色谱纯化及重组肠激酶切割后,电喷雾质谱鉴定Talpha1-TP5。结果选用TB培养基,在菌体对数生长中后期加入终浓度为0.05 mmol/L的IPTG,37℃诱导5 h,GST融合蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的35.8%,且主要以可溶形式表达。Talpha1-TP5的分子质量与理论值相似。结论 Talpha1-TP5成功在E.coli中表达,并确定了最佳表达条件。
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
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