标题:中华大蟾蜍“高温卵”cDNA文库的构建
作者:孔维华,顾正,潘勇,左嘉客
作者机构:[孔维华,顾正,潘勇,左嘉客]山东大学生命科学学院发育生物学研究所,上海市计划生育科学研究所,上海市计划生育科学研究所,上海市计划生育科学研究所 山东济南25010 更多
来源:山东大学学报(自然科学版)
出版年:2001
期:04
页码:461-464
关键词:中华大蟾蜍;高温卵;cDNA文库;成熟潜能
摘要:以长足但不具成熟潜能的中华大蟾蜍“高温卵”为材料 ,提取总RNA和mRNA ,以NotI/OligodT18为引物 ,经反转录合成第 1链cDNA ;再以DNAPolymeraseI合成第 2链 .所得到的cDNA加装衔接头后定向克隆到λ ExCell载体上 ,构建cDNA文库 .结果显示 ,平均每个“高温卵”中总RNA的含量为 5.66μg ,polyA+RNA含量约为 63 .96ng ,构建的cDNA文库的丰度为 8.93×1 0 - 5 pfu/ μgcDNA .随机挑选的 2个重组噬菌体经NotI、EcoRI双酶切后 ,均能酶切出外源片段 ,说明我们已成功地构建了中华大蟾蜍“高温卵”...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDDX200104019&DbName=CJFQ2001
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