标题:蠕形螨cDNA文库的构建及鉴定
作者:肖克源;郭淑玲;刘艳荣;苏磊;冯玉新;袁方曙;
作者机构:[肖克源;郭淑玲;刘艳荣;苏磊;冯玉新;袁方曙]山东大学医学院病原生物学研究所;[肖克源;郭淑玲;刘艳荣;苏磊;冯玉新;袁方曙]山东大学医学院细胞生物学研究所 更多
来源:山东大学学报(医学版)
出版年:2012
期:05
页码:15-19
关键词:螨;基因文库;聚合酶链反应
摘要:目的构建蠕形螨cDNA文库,以便进一步研究蠕形螨相关的基因。方法采用自然沉降法收集山羊蠕形螨,用TransZol Up试剂盒提取其总RNA,然后反转录合成第1链cDNA,通过LD-PCR获得第2链cDNA,将双链cDNA纯化去除小片段,收集大于500 bp的cDNA片段,与pGM-T载体连接,将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞TOP10建成蠕形螨cDNA文库,检验文库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入cDNA片段大小进行分析。结果 cDNA文库的库容量为2.56×106cfu,重组效率达98%,平均插入片段长度大于1 000 bp。结论构建的蠕形螨cDNA文库质量良好,为进一步对蠕形螨基因探...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB201205003&DbName=CJFQ2012
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