标题:人TNF-alpha突变体Y87H/A145R的表达及纯化
作者:李壮林; 姚雪静; 于学珍
作者机构:[李壮林]山东大学, 微生物国家重点实验室, 济南, 山东 250100, 中国;[姚雪静]烟台荣昌生物工程有限公司, 烟台, 山东 264006, 中国;[于学珍]烟台荣昌生物工程有限 更多
来源:中国医药工业杂志
出版年:2011
卷:42
期:5
页码:332-336
DOI:10.3969/j.issn.1001-8255.2011.05.006
关键词:人肿瘤坏死因子-alpha; 突变体; 表达; 纯化; 包涵体
摘要:用大肠杆菌表达人肿瘤坏死因子-alpha (TNF-alpha)的突变体Y87H/A145R,并研究其生物学特性。在5; L发酵罐中培养大肠杆菌工程菌,当菌体密度(D600)增长到35时,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目标蛋白表达,包涵体蛋白的最终表达水平为2; .5 g/L。用HighQ; Micro-prep凝胶柱纯化包涵体蛋白,然后通过透析复性,蛋白纯度大于99%。用分子排阻色谱分析Y87H/A145R的分子特征。结果表明,Y8; 7H/A145R与TNF-alpha-样,以三聚体形式存在。而且,Y87H/; A145R能明显抑制TNF-alpha诱导的L929细胞凋亡。小鼠试验表明,突变体Y87H/A145R不但失去了TNF-alpha的细胞毒性,并; 且能有效抑制TNF-alpha引起的急性肝坏死。
收录类别:中国知网;万方;CSCD
WOS核心被引频次:1
资源类型:期刊论文;期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=ZHOU201105005&DbName=CJFQ2011
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