标题:携带16 kD抗原多肽的PP7噬菌体样颗粒的制备及其对结核病诊断的价值评估
作者:伊正君;孙艳花;赵荣兰;路晓红;李纾;李猛;孙艳丽
作者机构:[伊正君] 潍坊医学院医学检验学系, 潍坊, 山东 261053, 中国.;[赵荣兰] 潍坊医学院医学检验学系, 潍坊, 山东 261053, 中国.;[李猛] 潍坊医学院医学检验学系, 潍坊 更多
来源:临床检验杂志
出版年:2018
卷:36
期:1
页码:57-61
DOI:10.13602/j.cnki.jcls.2018.01.16
关键词:PP7噬菌体; 16 kD抗原; 结核病; 多肽
摘要:目的获得表面展示有16 kD抗原多肽(16kD_(91-110))的PP7噬菌体样颗粒(bacteriophage-like particle,BLPs),并评价其在结核病诊断中的价值。方法用普通PCR技术扩增出含16kD_(91-110)多肽编码基因的PP7衣壳蛋白基 因,将其插入到pETDuet- 2PP7载体中,获得pETDuet-2PP7-16kD_(91-110)质粒;将上述重组质粒转化大肠埃希菌,诱导表达产物用SDS-PAGE和we stern blot进行鉴定;将纯化的2PP7-16kD_(91-110)作为刺激抗原,用ELISA间接法检测结核病患者血清中的16 kD抗体水平。结果SDS-PAGE及电镜结果显示成功表达2PP7-16kD_(91-110)BLPs,并且展示于PP7 BLPs表面的16kD_(91-110)多肽表位能特异性与抗16 kD抗体结合;对活动性肺结核和潜伏性肺结核患者,以2PP7-16kD_(91-110) BLPs为刺激抗原的全血释放gamma干扰素试验的敏感性分别为75%和82.9%,与北京万泰结核分枝杆菌相关gamma干扰素释放试剂盒相比,差异 无统计学意义。结论成功制备表面展示有16kD_(91-110)多肽的PP7 BLPs,为应用gamma干扰素释放试验检测结核分枝杆菌提供了一种安全性高、稳定性好、价格低廉的刺激抗原,为结核病的诊断提供一种新的思路。
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://lib.cqvip.com/qk/91229X/201801/674649286.html
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