标题:Paenibacillus sp. K1 alpha-半乳糖苷酶酶学性质
作者:辛永平;孔文涛;陆文伟;孔健
作者机构:[辛永平] 山东大学, 微生物技术国家重点实验室, 济南, 山东 250100, 中国.;[陆文伟] 山东大学, 微生物技术国家重点实验室, 济南, 山东 250100, 中国.;[孔健] 山东 更多
来源:山东大学学报. 理学版
出版年:2015
卷:50
期:1
页码:50-55
关键词:类芽孢杆菌; alpha-半乳糖苷酶; 酶学性质
摘要:利用CODEHOP PCR和Anchor-ligated PCR方法从类芽孢杆菌Paenibacillus sp. K1中克隆得到一个alpha-半乳糖苷酶基因agaP1,大小为2 190 bp,同源性分析显示,该基因与其他alpha-半乳糖苷酶基因的序列相似低,是一个新的alpha-半乳糖苷酶基因。将agaP1在大肠杆菌Origa mi B(DE3)中表达并纯化获得AgaP1,酶学性质分析显示:以 pNPG为底物时,AgaP1最适反应温度为40 ℃,最适pH 6. 5~ 10,Km值为0. 75 mmol/L,最大反应速率Vmax为1. 96 mumol?min~(-1)?mg~(-1)。同时Fe~(2+)、Mg~(2+)、Ca~(2+)、K~+和甘油能使alpha-半乳糖苷酶酶活提高 1~3倍,而Cu~(2+)、 Zn~(2+)、Fe~(~(3+))和还原型谷胱甘肽则抑制该酶的活性。SDS-PAGE检测AgaP1蛋白大小约为80 ku,与理论预测值基本一致; Native-PAGE分析表明正常条件下AgaP1蛋白以二聚体或六聚体形式存在。以上结果显示,Paenibacillus sp. K1产生的alpha-半乳糖苷酶为一个新的低温alpha-半乳糖苷酶。
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
TOP