标题:肠道病毒71型微复制子的构建
作者:马英伟;孙乐乐;李静;乔乔;庄志超;赵丽;于学杰;王志玉;温红玲;孙妍琳;
作者机构:[马英伟;孙乐乐;李静;乔乔;庄志超;赵丽;于学杰;王志玉;温红玲;孙妍琳]山东大学公共卫生学院病毒学实验室
来源:山东大学学报(医学版)
出版年:2015
期:09
页码:35-40
关键词:肠道病毒71型;微复制子;报告基因;非结构蛋白
摘要:目的构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系,研究微复制子的复制及表达情况。方法聚合酶链式反应扩增绿色荧光蛋白(EGFP),利用特定酶切位点及连接酶,将目的基因片段连接至p MD19-T载体,分别构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系。荧光显微镜下观察微复制子表达情况,实时荧光定量PCR观察微复制子复制情况。结果 EV71非结构蛋白微复制子及EV71 3C蛋白酶微复制子表达后,均可观察到特异性绿色荧光,荧光强度有明显差异;转染后12~72 h取样所测RNA含量几乎不变。结论非结构蛋白全长及3C蛋白酶启动微复制子转录强度不同,所构建微复制子不具备复制功能,提示结...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB201509007&DbName=CJFQ2015
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