标题:小麦幼叶cDNA文库的构建
作者:吴耀荣;赵双宜;夏光敏
作者机构:[吴耀荣] 山东大学生命科学学院, 济南, 山东 250100, 中国.;[赵双宜] 山东大学生命科学学院, 济南, 山东 250100, 中国.;[夏光敏] 山东大学生命科学学院, 济南, 山 更多
来源:山东大学学报. 理学版
出版年:2003
卷:38
期:2
页码:101-104
关键词:小麦; 幼叶; cDNA文库
摘要:提取小麦辉县红的三叶期幼叶总RNA,利用RNA5端模板转换技术(SMART,the Switch Mechanism Al the 5end of RNA Transcript)合成cDNA的第一链,再经21个循环的长距离PCR(LD-PCR)合成双链cDNA,经蛋白酶K消化、纯化cDNA、Sfil (A和B)酶切、过CHROMA SPIN-400柱分级分离除去400bp以下的小分子,与经过5端脱磷的lambdaTriplEx2/Sfi(A和B)/CIP载体进行连接,经体外 包装和感染XL1-BLue宿主菌,得到了1.0056*10~6个独立的噬菌体克隆。从中随机挑选100个克隆进行PRCR反应,电泳结果显示PCR产 物大于500bp的片段占81%,由此认为小麦幼叶cDNA文库已建立。
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDDX200302023&DbName=CJFQ2003
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