标题:快速展示糖苷水解酶活性架构单点突变导致结合力变化的电泳技术
作者:吴秀芸;刘淑萍;赵越;陈冠军;王禄山;
作者机构:[吴秀芸;刘淑萍;赵越;陈冠军;王禄山]山东大学微生物技术国家重点实验室
通讯作者:Wang, LS
通讯作者地址:[Wang, LS]Shandong Univ, State Key Lab Microbial Technol, Jinan 250100, Shandong, Peoples R China.
来源:生物化学与生物物理进展
出版年:2018
卷:45
期:5
页码:560-570
DOI:10.16476/j.pibb.2017.0342
关键词:亲和电泳;;结合力;;定量测定;;等温滴定量热法;;荧光光谱法
摘要:酶分子在长期进化过程中形成一系列氨基酸残基组成的活性架构,参与底物的识别、结合与催化过程,而活性架构中相应氨基酸残基是如何影响酶分子结合底物的能力,进而影响酶分子的催化效率,一直是酶分子理性改造研究的热点.利用亲和电泳技术,可以快速展示内切纤维素酶Tr Cel12A和木聚糖酶Tl Xyn A活性架构中不同突变体的催化活性及其迁移率的变化,进而通过在不同底物浓度凝胶中蛋白质相对迁移率变化程度的定量回归分析,发现由氨基酸单点突变导致蛋白质迁移率的相对变化,可以定量表征酶分子突变前后结合底物能力的变化.亲和电泳测定的有效阻滞常数Kb值与等温滴定量热法和荧光光谱法测定的相关参数比较具有明显相关性.由于...
收录类别:CSCD;SCOPUS;SCIE
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SHSW201805010&DbName=CJFQPREP
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