标题:nsP2-726Pro定点诱变对辛德毕斯病毒XJ-160复制子载体特性的影响
作者:唐丽;朱武洋;付士红;何英;王志玉;梁国栋
作者机构:[唐丽] 山东大学,公共卫生学院, 济南, 山东 250012, 中国.;[王志玉] 山东大学,公共卫生学院, 济南, 山东 250012, 中国.;[朱武洋] 中国疾病预防控制中心病毒病预防 更多
来源:病毒学报
出版年:2010
卷:26
期:2
页码:121-127
关键词:XJ-160病毒; 复制子载体; 定点诱变
摘要:为观察nsP2-726Pro定点诱变对辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SINV)XJ-160复制子载体特性的影响,以XJ160病毒复制子载体pBRepXJ为分子基础,利用定点诱变方法分别构建突变载体pB Rep-726L、pBRep-726S、pBRep-726V和pBRep-726A.将新霉素抗性基因(Neomycin~r,Neo~r)克隆到p BRepXJ和各突变载体中,通过细胞培养方法观察nsP2-726Pro定点诱变对载体致细胞病变作用(Cytopathic effect,CPE)的影响;并将增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green-fluorcscent protein,EGFP)和海肾萤光素酶(Renilla Luciferase,R.luc)报告基因分别插入到各载体中,定性与定量检测定点诱变对复制子载体自主复制能力的影响.实验结果表明,突变载体pBR ep-726V和pBRep-726A在BHK-21细胞中的自主复制能力高于pBRepXJ,所诱发的细胞病变进程更快.替换突变nsP2726Pro Leu的引入使载体在保持包装能力的同时,完全丧失在细胞上引起CPE的能力.而pBRep-726S则具有中间表型.提示nsP2-726Pro定点诱 变在影响XJ-160复制子载体自主复制能力的同时,也改变了CPE的进程.这将为研究辛德毕斯病毒基因组结构与功能的关系及构建非细胞病变的甲病毒载体 奠定基础.
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=BDXB201002009&DbName=CJFQ2010
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