标题:青岛文昌鱼神经胚中期cDNA文库的构建
作者:张燕君,陈忠科,张红卫
作者机构:[张燕君,陈忠科,张红卫]山东大学生命科学学院!山东济南250100,山东大学生命科学学院!山东济南250100,山东大学生命科学学院!山东济南250100 更多
来源:山东大学学报(自然科学版)
出版年:2001
期:01
页码:101-106
关键词:青岛文昌鱼;神经胚;cDNA文库
摘要:提取青岛文昌鱼 1 8小时神经胚中期mRNA ,以 5′脱磷的NotⅠ oligo(dT) 18为引物 ,反转录合成cDNA .双链cDNA的 5′端钝端连接上带EcoRⅠ突出末端的衔接头 ,再经NotⅠ酶切 ,在cDNA的 3′端形成NotⅠ突出末端 .以SizeSep离心层析柱除去 4 0 0bp以下的小分子 ,与带有NotⅠ和EcoRⅠ突出末端并经过 5′端脱磷的λExCellNotⅠ /EcoRⅠ /CIP载体DNA进行连接 ,经体外包装和感染NM52 2宿主菌 ,得到了 3.6× 1 0 4个独立的重组噬菌体克隆 .从中随机选取 2个克隆提取DNA ,NotⅠ、EcoRⅠ双酶切 ,电...
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDDX200101017&DbName=CJFQ2001
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