标题:应用ntPCR-RFLP技术检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异
作者:闫杰;谢雯;王磊;冯鑫;宋淑静;成军;于岩岩
作者机构:[闫杰] 北京大学第一医院感染科, 北京 100034, 中国.;[于岩岩] 北京大学第一医院感染科, 北京 100034, 中国.;[谢雯] 北京地坛医院, 北京 100011, 中国.;[冯鑫] 北 更多
来源:中国病原生物学杂志
出版年:2008
卷:3
期:1
页码:1-4
关键词:阿德福韦; 肝炎病毒; 乙型; 变异; 巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术
摘要:目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异及rtA181V变异的快速检测方法。方法根据G enBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株rt236NPCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5′-TTTAAA-3′),而变异株r t236T无此限制性酶切位点;使野生株rt181APCR产物中含有BlpⅠ酶切位点(5′-GCTNAGC-3′),而变异株rt181V无此限制性 酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBVDNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、限制性内切酶酶切及凝胶电泳,进行限制性 片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBVRT区基因序列分析。结果建立的ntPCR-RFLP方法可以检测 到10^2copies/L的HBVDNA;RFLP分析结果与DNA测序结果一致,4份血清标本中检测到1份rtN236T变异,2份rtA181V变 异。结论应用ntPCR-RFLP方法检测HBV阿德福韦耐药变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于HBV耐药变异的监测。
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=ZISC200801000&DbName=CJFQ2008
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