标题:抗MIF单克隆抗体的制备及其放射性碘标记方法
作者:宋静;张超;梁婷;陈富强;侯桂华
作者机构:[宋静] 山东大学医学院实验核医学研究所, 济南, 山东 250012, 中国.;[张超] 山东大学医学院实验核医学研究所, 济南, 山东 250012, 中国.;[梁婷] 山东大学医学院实 更多
来源:山东大学学报. 医学版
出版年:2010
卷:48
期:5
页码:28-31
关键词:巨噬细胞移动抑制因子; 单克隆抗体; 放射性同位素; 小鼠; 近交BALB/c
摘要:目的制备抗小鼠巨噬细胞移动抑制因子(mMIF)单克隆抗体(McAb)对其进行放射性碘标记,为进一步研究MIF在炎症、肿瘤核素显像中的意义奠定基础 . 方法异丙基硫代-beta-D-半乳糖(IPTG)诱导pEQ30-mMIF/M15工程菌表达重组mMIF蛋白;采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,蛋白质 印迹技术(Western blotting)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行特异性鉴定,巨噬细胞移动抑制试验(MMI)鉴定生物学活性. 采用二氯二苯基甘脲(Iodogen)法,用Na~(125)I标记抗mMIF单克隆抗体. 结果成功建立3株稳定高效价分泌抗mMIF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5G_2D_7,5G_2C_7,5G_2E_3. 经Western blotting、ELISA和MMI鉴定证明抗mMIF单克隆抗体具有良好的抗原特异性和生物学活性;~(125)I-抗mMIF单克隆抗体的标记率为 90.40%,放射化学纯度98.36%,放射性比活度为21.48MBq/mug. 结论成功制备抗mMIF单克隆抗体和放射性碘标记抗mMIF单克隆抗体,为深入研究MIF相关性疾病和利用MIF进行临床肿瘤及炎症放射免疫显像提供了实 验基础
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB201005009&DbName=CJFQ2010
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