标题:重组人可溶性DR5 蛋白的表达、制备及其生物活性检测
作者:梁晓红;孙汶生;高立芬;马春红;韩丽辉;王晓燕;张宁;郭春
作者机构:[梁晓红] 山东大学医学院免疫学研究所, 济南, 山东 250012, 中国.;[孙汶生] 山东大学医学院免疫学研究所, 济南, 山东 250012, 中国.;[高立芬] 山东大学医学院免疫 更多
来源:山东大学学报. 医学版
出版年:2004
卷:42
期:3
页码:252-256
关键词:重组蛋白类; HeLa细胞; 受体,DR5; 细胞凋亡
摘要:目的:纯化毕赤酵母GS115菌株表达的重组人可溶性死亡受体5(DR5)蛋白,并研究其对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)所诱导细胞凋亡的 阻断效应.方法:大量扩增可溶性DR5酵母表达载体转化阳性的毕赤酵母GS115菌株,收集上清,利用ProBondTM亲和层析柱纯化获得重组可溶性D R5蛋白,用SDS-PAGE、Western Blot检验纯化产物的特异性和纯度.用MTT法检测纯化的可溶性DR5蛋白对TRAIL诱导人宫颈癌细胞系Hela细胞凋亡作用的阻断效应.结果:转化 阳性的毕赤酵母GS115菌株可成功表达分子量为26 kD的可溶性DR5蛋白,经ProBondTM亲和层析柱纯化,SDS-PAGE、Western Blot鉴定,结果显示获得了高纯度的重组人可溶性DR5蛋白,蛋白产量达20mug/ml;体外活性检测结果显示,纯化的可溶性DR5蛋白可部分阻断T RAIL诱导的Hela细胞的凋亡,阻断率最高达53.6%.结论:经纯化后的重组人可溶性DR5蛋白可有效阻断TRAIL诱导的细胞凋亡反应.
收录类别:CSCD
资源类型:期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB200403001&DbName=CJFQ2004
TOP