标题:H-2K~d基因siRNA表达质粒的构建及在小鼠LAK细胞的表达
作者:庄学伟;夏西燕;单宁宁;王洪春;张义;杨晓静;李晓丽;赵胜梅;邹雄
作者机构:[庄学伟] 山东大学齐鲁医院检验科, 济南, 山东 250012, 中国.;[单宁宁] 山东大学齐鲁医院检验科, 济南, 山东 250012, 中国.;[王洪春] 山东大学齐鲁医院检验科, 济 更多
会议名称:中华医学会第七次全国检验医学学术会议
来源:山东大学学报. 医学版
出版年:2008
卷:46
期:6
页码:590-593
关键词:质粒; H-2K~d基因; 小干扰RNA
摘要:目的 构建针对BALB/C小鼠H-2K~d基因siRNA表达质粒,观察其在小鼠LAK细胞的表达,为进一步研究H-2K~d基因功能奠定基础.方法 设计siRNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化的pSi-lencer 3.0-H1连接,转化大肠杆菌DH5a扩增纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.采用siRNA表达质粒封闭 小鼠LAK细胞MHC-1(H-2K~d)的表达,同时设空转染组和无关序列组,流式细胞术检测不同组剐靶蛋白的表达.结果 纯化的质粒分子量为2.8Kb,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符,流式细胞术检测证实siRNA能够抑制靶蛋白的表达.结论 成功构建了针对H-2K~d基因的siRNA表达质粒并抑制了其表达.
收录类别:CSCD
资源类型:会议论文;期刊论文
原文链接:http://kns.cnki.net/kns/detail/detail.aspx?FileName=SDYB200806009&DbName=CJFQ2008
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